类器官培养上清里的细胞因子和生长因子怎么检测?

2026年09月03日  |  分类:技术文章

本文要点

  • 类器官培养上清携带分泌因子与细胞外囊泡,是类器官功能状态的读出窗口
  • iPSC 来源表皮类器官分泌的 EVs 富集 VEGF 等因子(Biomaterials 2024),用生长因子芯片一次检测 20 个小鼠生长因子
  • LIN28B 经 PI3K/AKT 通路驱动结直肠癌转移(JCI 2025),AKT 通路磷酸化芯片一次读 18 个磷酸化位点
  • 肝脏类器官 iHLC 分泌 AFP 作为功能标志物(J Hepatol),大鼠细胞因子芯片一次筛 48 个因子
  • 上清样本量少、靶标多:单因子 ELISA 逐个测费样本,多因子芯片一次并行更合适

上清是类器官的“功能读出窗口”

类器官(Organoid)是由多能干细胞诱导分化并自组装形成的三维组织结构,在细胞类型多样性、组织架构复杂性与代谢成熟度上明显优于传统二维培养。当研究关注点从形态学延伸到功能学时,培养上清的价值凸显出来:类器官分泌到培养基里的细胞因子、生长因子以及细胞外囊泡(EVs)携带的蛋白,构成了类器官与微环境“对话”的分子证据,也是判断类器官功能状态的读出窗口。

三篇高分文献里的检测实践

表皮类器官与生长因子(Biomaterials,2024):研究者从诱导多能干细胞(iPSCs)构建了可稳定扩增的表皮类器官(iEpiOs),其分泌的细胞外囊泡富含血管内皮生长因子(VEGF)及调控增殖、迁移、分化与血管生成的 miRNAs。该研究使用 RayBiotech Mouse Growth Factor Array C2(货号 AAM-GF-2)对上清进行多因子检测,一次实验检测 20 个小鼠生长因子靶标。

结直肠癌类器官与通路磷酸化(Journal of Clinical Investigation,2025):研究阐明 LIN28B 通过激活 PI3K/AKT 信号通路驱动结直肠癌转移,患者来源类器官在机制验证中扮演关键角色。文中使用 Human/Mouse AKT Pathway Phosphorylation Array C1(货号 AAH-AKT-1),一次检测 AKT 通路 18 个关键磷酸化位点,同步考察通路激活状态。

肝脏类器官与分泌标志物(Journal of Hepatology):iPSC 来源肝样细胞类器官(iHLCs)具备白蛋白分泌、胆红素摄取等肝细胞功能,其分泌的甲胎蛋白(AFP)是研究中的关键功能读出之一;研究中采用大鼠细胞因子芯片一次筛选检测 48 个大鼠因子靶标,用于多因子全景分析。

上清检测的方法选择

类器官培养上清通常样本量有限,而待测靶标往往不止一个。单因子 ELISA 逐个检测会显著消耗样本;多因子抗体芯片在一次实验中并行读出多个细胞因子或生长因子,更适合上清这种“少量样本、多靶标”的场景。研究阶段建议遵循“先全景、后验证”:先用多因子芯片并行筛查上清中的候选因子谱,再对关键靶标用单因子定量方法复验。

相关产品

上文文献使用的 RayBiotech 多因子检测产品(常誉生物提供选型与报价咨询):Mouse Growth Factor Array C2(AAM-GF-2)——一次检测 20 个小鼠生长因子;Human/Mouse AKT Pathway Phosphorylation Array C1(AAH-AKT-1)——一次检测 AKT 通路 18 个磷酸化位点。更多类器官研究方案见 抗体芯片产品中心。仅供科研使用。

声明:本文内容仅用于科研领域交流,不用于临床诊断或其它相关领域。

延伸阅读(常誉生物公众号原文)

← 返回技术文章列表